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| 極端敏感性的測(cè)試線和控制線的出現(xiàn) | |||
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佛羅里達(dá)州的格式是一個(gè)基于標(biāo)記的生物標(biāo)志物的使用cibitest公司協(xié)議的特殊方法（新烏爾姆，德國(guó)）。測(cè)試條制造，以同樣的方式作為傳統(tǒng)lfias，使用標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)備，如BioDot Inc. BioDot xyz3050平臺(tái)（歐文，CA）和標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試條的材料如用Whatman國(guó)際有限公司immunopore硝酸纖維素膜（梅德斯通，肯特，英國(guó)）。然而，在對(duì)比傳統(tǒng)的lfias，其中金顆粒或乳膠顆粒作為標(biāo)簽使用的熒光染料，佛羅里達(dá)。這個(gè)標(biāo)記技術(shù)，一個(gè)只有一少部分每兆的檢測(cè)限可與競(jìng)爭(zhēng)免疫分析以及直接格式像夾心分析法實(shí)現(xiàn)，同時(shí)還獲得視覺(jué)信號(hào)。
在間接免疫所示的情況下（例如，lfias使用膠體金），在測(cè)試結(jié)果的評(píng)價(jià)沒(méi)有顯著的變化是必要的（參見(jiàn)圖1）。當(dāng)兩個(gè)線路的測(cè)試線和控制線的出現(xiàn)，樣品中沒(méi)有被分析物。如果只控制線出現(xiàn)，對(duì)應(yīng)的截止水平，分析物的存在。
由于，佛羅里達(dá)技術(shù)采用熒光染料的事實(shí)，評(píng)估測(cè)試條要求的熒光團(tuán)的附加勵(lì)磁。然而，由于特殊的標(biāo)記方法，結(jié)果在一個(gè)非常強(qiáng)的熒光信號(hào)，一個(gè)簡(jiǎn)化的讀者是足夠用于此任務(wù)。插入測(cè)試帶到手持燈后，測(cè)試信號(hào)產(chǎn)生的測(cè)試和控制線路可以檢測(cè)視覺(jué)（參見(jiàn)圖2）。由于其鮮明的信號(hào)，佛羅里達(dá)州產(chǎn)生快速免疫分析的強(qiáng)烈著色的標(biāo)本。由于與一個(gè)手持燈效果的評(píng)價(jià)，結(jié)果可以在惡劣的照明，甚至在完全的黑暗中。
佛羅里達(dá)州的敏感性佛羅里達(dá)的極端敏感性可以通過(guò)一定的熒光共軛高密度的載體分子，然后結(jié)合抗體熒光復(fù)雜的實(shí)現(xiàn)。的增強(qiáng)作用的結(jié)果從熒光基團(tuán)共軛單抗體的比率非常高。熒光染料的直接結(jié)合與抗體（例如，通過(guò)NHS酯染料），熒光抗體的摩爾比為約100–提高1000倍。因此，在三個(gè)數(shù)量級(jí)的靈敏度的增加，可以實(shí)現(xiàn)。
證明，這種敏感性與親和純化的抗血清確定?β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素。如圖所示圖3該抗血清，采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA以及在佛羅里達(dá)州的格式在緩沖溶液氨芐青霉素的檢測(cè)。ELISA的檢測(cè)限為約0.5毫微克/毫升，和測(cè)試的中點(diǎn)為10毫微克/毫升（10 ppb），有很好的對(duì)應(yīng)，這類(lèi)試驗(yàn)的期望。為定量佛羅里達(dá)的格式，為10 pg / mL的截止值（10個(gè)百分點(diǎn)）的測(cè)定。這一發(fā)現(xiàn)有大約三個(gè)數(shù)量從傳統(tǒng)的金標(biāo)記的側(cè)流試驗(yàn)的平均靈敏度幅值。8可比的敏感性可以經(jīng)常只有在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下實(shí)現(xiàn)了放射免疫測(cè)定法。但是佛羅里達(dá)的系統(tǒng)是一個(gè)現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試，最新的數(shù)據(jù)顯示，在靈敏度這意外的增加連接到特殊的方法結(jié)合熒光抗體。
熒光信號(hào)的穩(wěn)定性用于佛羅里達(dá)系統(tǒng)熒光耐光性是不是測(cè)試性能的一個(gè)限制因素。隨著凍干的熒光測(cè)試杯之前使用存儲(chǔ)在黑暗的環(huán)境中。可以進(jìn)行測(cè)試，在白天沒(méi)有問(wèn)題。即使長(zhǎng)色譜最多20分鐘不引起光漂白。使用手持燈評(píng)估后，條帶進(jìn)行干燥和容易獲得的。只要他們都儲(chǔ)存在黑暗條件下，信號(hào)可以直觀地看，即使經(jīng)過(guò)18個(gè)多月。
它也有可能對(duì)信號(hào)的光電方式（例如，使用適當(dāng)?shù)能浖黄痣姾神詈掀骷障鄼C(jī)）。如圖所示圖4，與零信號(hào)相比，增加的熒光背景可以檢測(cè)。這樣的背景信號(hào)通常不干擾測(cè)試的視覺(jué)評(píng)估。采用光電檢測(cè)系統(tǒng)時(shí)，適當(dāng)?shù)慕刂惯x擇將分離的背景信號(hào)從測(cè)試信號(hào)完全。通過(guò)令人興奮而不是紫外線藍(lán)光熒光團(tuán)，可能可以降低干擾。然而，可能還有一些標(biāo)本的熒光會(huì)引起強(qiáng)背景信號(hào)。例如，一個(gè)熒光基團(tuán)與佛羅里達(dá)州目前使用的技術(shù)是不適合用牛奶。這是因?yàn)橐粋€(gè)測(cè)試條用牛奶樣品和藍(lán)色光激發(fā)會(huì)表現(xiàn)出綠色熒光，不易辨識(shí)。
另一個(gè)例子是吖啶測(cè)試。這種物質(zhì)，這是在某些微生物的選擇性富集補(bǔ)充（例如，單），也有一個(gè)自發(fā)熒光干擾測(cè)試信號(hào)。為了能夠使用這些矩陣的佛羅里達(dá)州的格式，其他的熒光團(tuán)與更大的斯托克斯位移正在開(kāi)發(fā)。這樣的熒光團(tuán)發(fā)射在一個(gè)紅色的光譜范圍，可以輕易地分辨出綠色熒光。發(fā)展中的標(biāo)簽，不斷提高檢測(cè)系統(tǒng)（例如，通過(guò)創(chuàng)建，允許讀者的客觀評(píng)價(jià)結(jié)果）。然而，有一個(gè)問(wèn)題仍然是困難的，或在某些情況下是不可能的，要解決的是標(biāo)簽的增加靈敏度超過(guò)一定限度。
通常情況下，檢測(cè)限較低的部分每十億范圍內(nèi)發(fā)現(xiàn)，有一種特別的抗體可能稍低。相反，可以使用嗎啡側(cè)流測(cè)定，只能通過(guò)改變膠體金標(biāo)簽從佛羅里達(dá)的方法，通過(guò)100級(jí)的測(cè)試靈敏度增加，沒(méi)有任何進(jìn)一步的優(yōu)化。唯一的區(qū)別是一個(gè)簡(jiǎn)單的讀者的要求。由于佛羅里達(dá)州的標(biāo)記方法創(chuàng)造了強(qiáng)烈的信號(hào)，不需要非常復(fù)雜和昂貴的讀者，如與其他標(biāo)記方法的開(kāi)發(fā)。現(xiàn)有的熒光標(biāo)記技術(shù)，順磁性顆粒，和其他更奇特的標(biāo)簽提供良好的靈敏度和量化的可能性，當(dāng)然比黃金或乳膠。然而，對(duì)測(cè)試系統(tǒng)的成本，以及檢測(cè)設(shè)備，使這些技術(shù)只適用于高成本的分析。佛羅里達(dá)州的方法，另一方面，使視覺(jué)讀數(shù)與基本的讀者，可在低成本的篩選應(yīng)用具有高靈敏度的需要。
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